在細胞凍存的過程中，液態(tài)水轉(zhuǎn)化為冰，細胞代謝停止。同時，水分也隨之散失，導致細胞內(nèi)鹽、代謝物濃度改變，進而造成滲透壓失衡，直接影響凍存細胞的復蘇。同時，冷凍速率太快或太慢，容易導致細胞內(nèi)水分喪失或形成大冰晶，都不利于細胞存活。通過使用程控降溫儀，選擇合適的凍存液，設定合適的升降溫速率，可有效地克服上述不利因素。實踐證明，（經(jīng)溫度補嘗后）每分鐘1-3℃的冷凍速率可大大提高凍存細胞的存活率。